Tipos de reacción:

Carboxilacion

Esta reacción sucede en la matriz mitocondrial en presencia de ATP y biotina. El mecanismo de reacción ocurre en dos fases, en dos sitios diferentes de la enzima. En el sitio 1 (primera fase), el ion bicarbonato (formado a partir de CO2) y el ATP reaccionan formando carboxifosfato, los cuales transfieren el CO2 a la biotina, formando el complejo carboxibiotinil-enzima (la enzima y la biotina se unen primero formando el complejo biotinil-enzima). Finalmente, en la segunda fase, el CO2 de la carboxibiotinil-enzima pasa al sitio catalítico 2 reaccionando con el piruvato, formando oxaloacetato y regenerando la biotinil-enzima.